常規(guī)培養(yǎng)基的制備、滅菌與消毒

更新時(shí)間：2020-07-25

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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

清楚培養(yǎng)基的配制原理，了解配制培養(yǎng)基的常用方法和步驟，認(rèn)識(shí)常見滅菌、清毒基本原理及方法，掌握過濾除菌、高壓蒸汽滅菌及干熱滅菌的操作方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理

培養(yǎng)基是人工按比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為水、無(wú)機(jī)鹽、氮源、碳源和生長(zhǎng)因素。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有多種不一樣的種類和配制方法。蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。

三、器材與試劑

1.器材：試管、玻璃棒、培養(yǎng)基、牛角匙、分裝器、三角瓶、燒杯、量筒、天平、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、鑷子、麻繩、棉花、牛皮紙、記號(hào)筆、紗布、培養(yǎng)皿、干熱滅菌箱、注射器、吸管、微孔濾膜過濾器等。
2.試劑蛋白胨、NaCl、瓊脂
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查

2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物

3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查

4.過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
五、關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng)

1.要嚴(yán)格按配方配制。

2.調(diào)pH不要過頭。

3.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊，注意溫度的時(shí)間控制，60ºC以下放物、取物。

4.高壓滅菌要注意物品不要過多，加熱后先排除冷空氣，降壓回零后取物。

5.過濾除菌要注意各部件滅菌，壓濾時(shí)，壓力要適當(dāng)，不可太猛太快，濾膜要注意清洗保存。

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